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【多聚甲醛】它是良好的固定液

    多聚甲醛是多種組織細(xì)胞是良好的固定液，對(duì)脂類(lèi)及酶類(lèi)的保存均優(yōu)于其他固定劑，丙i酮對(duì)保存多糖類(lèi)及蛋白質(zhì)也有較好的效果，而且多聚甲醛的自發(fā)熒光非常弱，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有影響，是做免i疫熒光比較好的固定劑。

 多聚甲醛是不會(huì)影響熒光表達(dá)的觀察的，但是在進(jìn)行多聚甲醛固定時(shí)以及隨后的免i疫熒光染色時(shí)一定要注意避光，同時(shí)在選擇熒光染料時(shí)注意激發(fā)光波長(zhǎng)與發(fā)射光波長(zhǎng)不要與綠色熒光蛋白的太近就可以了。多聚甲醛現(xiàn)貨

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“聚甲醛配置”多一分不多，少一分不少

我們應(yīng)該如何配置多聚甲醛.在放置磁力攪拌棒的容器中,將4克多聚甲醛(EM級(jí))溶解于100ml PBS,加入數(shù)滴NaOH,在通風(fēng)廚中60℃加熱(打開(kāi)瓶蓋)使溶解,冷卻至室溫,調(diào)整PH值為7.4,使用前新鮮配制.  常用的固定劑種類(lèi)很多,固定劑的正確選擇取決于被研究抗原的性質(zhì)及所用抗i體的特性.固定劑可分為兩類(lèi):有機(jī)的溶劑和交聯(lián)劑.有機(jī)的溶劑如乙醇和丙i酮能夠去處脂類(lèi)物質(zhì)使細(xì)胞脫水,把蛋白質(zhì)沉淀在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上.交聯(lián)劑如多聚甲醛一般通過(guò)自由氨基基團(tuán)把生物分子橋連起來(lái),形成一個(gè)相互交聯(lián)的抗原網(wǎng).多聚甲醛配置的方法可能多種多樣，因?yàn)槊總€(gè)公司都有自己的配置方法。

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從組織學(xué)的觀點(diǎn)來(lái)說(shuō)，甲醛是一種良好的固定劑,它有很多的優(yōu)點(diǎn)： 組織收縮較少,損傷少,保存固有物質(zhì)好；固定均勻,穿透力強(qiáng)；能使組織硬化,增進(jìn)組織彈性,有利于切片；能保存脂肪及脂類(lèi)物質(zhì)；成本較低。雖然甲醛有上述的優(yōu)點(diǎn),但這都是相對(duì)而言,任何物質(zhì)都不可能十全十美的,它也有許多缺點(diǎn)： 雜質(zhì)含量較多,如甲醇,可鈍化酶類(lèi),影響反應(yīng)；含有微量甲酸,導(dǎo)致固定液酸變,影響染色；可產(chǎn)生福爾馬i林色素,影響觀察；不能固定尿酸和糖類(lèi)物質(zhì)；容易揮發(fā),污染環(huán)境,可導(dǎo)致標(biāo)本干涸；可長(zhǎng)期存在于固定過(guò)的組織上。有人做過(guò)實(shí)驗(yàn),組織用甲醛固定后在流水中沖洗5小時(shí)后,仍留有相當(dāng)多的甲醛與蛋白質(zhì)相結(jié)合,但需要經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的流水沖洗(24天的沖洗)方能除去.可見(jiàn)存在于組織上的甲醛是不可能除去的.因?yàn)榕R床活檢不可能有這么長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)沖洗組織.因此要特別指出的是,在其后的各種技術(shù)操作中,要特別注意到甲醛的存在,必須要想辦法除去它,否則將會(huì)給各種染色造成影響,甚至導(dǎo)致失敗。多聚甲醛現(xiàn)貨